MerTK Plasmídeo de ativação de CRISPR (m): sc-421631-ACT

O gene **Mertk** de camundongo codifica o **MerTK**, uma tirosina-quinase receptora da família **TAM** que reconhece a fosfatidilserina em células apoptóticas por meio de ligantes como **GAS6** e **PROS1**, promovendo a eferocitose e a resolução imune anti-inflamatória. A sinalização de MerTK ativa programas dependentes de **PI3K–AKT**, **MAPK/ERK** e **STAT**, coordenando a sobrevivência de macrófagos e micróglias, a modulação de citocinas e a homeostase tecidual. Na retina e no sistema nervoso central, MerTK favorece a remoção de detritos celulares e a manutenção de estados imunes adjacentes a barreiras, associando sua desregulação a fagocitose defeituosa, inflamação crônica e fenótipos relevantes para neurodegeneração. A atividade aberrante da via de MerTK também é estudada em macrófagos associados a tumores e na supressão imune no microambiente tumoral, tornando **Mertk** um alvo útil para dissecar a sinalização imune inata e a biologia de fagócitos em modelos murinos.

MerTK O Plasmídeo de Ativação CRISPR (m) oferece uma abordagem direcionada e não destrutiva para regular positivamente a expressão endógena de Mertk sem alterar a sequência de ADN subjacente.

MerTK O Plasmídeo de Ativação CRISPR (m) é um sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) de três plasmídeos, concebido para a regulação positiva transcricional altamente eficiente e específica do locus Mertk em linhas celulares humanas. O sistema é construído em torno de uma Cas9 cataliticamente inativa (dCas9) portadora de duas mutações inativadoras (D10A e N863A) que eliminam a atividade nuclease, preservando simultaneamente a ligação ao ADN. Esta dCas9 é fundida com VP64, um potente ativador transcricional, e é coexpressa com um gene de resistência à blasticidina para seleção. O segundo plasmídeo codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1, um complexo ativador secundário que atua em conjunto com o dCas9-VP64, juntamente com um gene de resistência à higromicina. O terceiro plasmídeo codifica um sgRNA de 20 nt específico para o alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 que recrutam o complexo MS2-p65-HSF1 para o local de ativação, acompanhado por um gene de resistência à puromicina. Os três plasmídeos são administrados numa proporção de massa de 1:1:1 para uma expressão equilibrada de todos os componentes do sistema.

Uma vez montado no locus alvo, o complexo SAM liga-se a cerca de 200 pb a montante do local de início da transcrição Mertk, onde VP64, p65 e HSF1 atuam em conjunto para recrutar a maquinaria transcricional e impulsionar a regulação positiva da expressão endógena de MerTK. Ao contrário da Cas9 com atividade nuclease, o dCas9 não introduz quebras de cadeia dupla nem modifica a sequência genómica, preservando o locus Mertk nativo e permitindo o estudo de respostas transcricionais dependentes de MerTK no locus endógeno, tornando-o uma ferramenta valiosa para estudos funcionais, identificação de genes-alvo e modelagem da restauração da via MerTK em células tumorais com expressão de Mertk silenciada ou reduzida.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.