Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
MDM2 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421611-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MDM2O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MDM2 (m) e o Plasmídeo Double Nickase MDM2 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Mdm2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MDM2 Anticorpo (SMP14): sc-965
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MDM2 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421611-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MDM2 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-421611-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Mdm2 de camundongo codifica a ligase E3 de ubiquitina MDM2, um regulador negativo central de TP53 que controla a estabilidade, a localização nuclear e a atividade transcricional da p53. Ao promover a ubiquitinação da p53 e sua degradação pelo proteassoma, a MDM2 modula respostas a danos no DNA, checkpoints do ciclo celular, apoptose e senescência em redes de sinalização de estresse, incluindo as vias ATM/ATR–CHK. A MDM2 também interage com a sinalização de estresse ribossomal e com a regulação por feedback do eixo p53, moldando os desfechos celulares sob estresse oncogênico ou genotóxico. A expressão ou atividade desregulada de Mdm2 é frequentemente associada à supressão anormal da via da p53 e é amplamente estudada em modelos de tumorigênese, integridade do genoma e homeostase do desenvolvimento.
MDM2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Mdm2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Mdm2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Mdm2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Mdm2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.