MDC1慢病毒激活颗粒(h): sc-405652-LAC

DNA 损伤检查点介导因子 1（MDC1）是一种核内支架蛋白，通过在 DNA 双链断裂位点结合 γH2AX 并放大检查点信号，来协调 DNA 损伤应答。MDC1 通过招募并稳定包括 ATM、RNF8/RNF168 泛素连接酶以及与 53BP1/BRCA1 相关的复合物在内的修复与信号因子，促进染色质重塑、损伤灶形成，并在非同源末端连接（NHEJ）与同源重组（HR）两条途径之间实现高效的通路选择。MDC1 的活性还与细胞周期检查点调控和基因组维护程序相交汇，从而抵御复制压力和染色体不稳定性。MDC1 依赖性信号通路的失调与 DNA 修复能力受损以及基因组不稳定表型相关，这些表型与肿瘤生物学及对 DNA 损伤应激因素的敏感性密切相关。

MDC1 慢病毒激活颗粒（h）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 MDC1 表达。

MDC1 慢病毒激活颗粒（h）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在MDC1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性MDC1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 MDC1 基因组位点和调控架构。

慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。