MAP-1B Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400981-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MAP-1BO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MAP-1B (h) e o Plasmídeo Double Nickase MAP-1B (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MAP1B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MAP-1B Anticorpo (H-8): sc-365668
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MAP-1B Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400981-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MAP-1B Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400981-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAP1B codifica a proteína 1B associada a microtúbulos (MAP-1B), um regulador do citoesqueleto de alto peso molecular que se liga aos microtúbulos e contribui para a sua estabilização e organização. A MAP-1B está fortemente associada ao desenvolvimento neuronal, sustentando o crescimento do axónio, a dinâmica do cone de crescimento e a extensão de neuritos por meio do controlo coordenado das interações microtúbulo–actina e da remodelação do citoesqueleto. A sua atividade cruza-se com processos como o transporte intracelular, a polaridade neuronal e a maturação sináptica, e é modulada por redes de sinalização dependentes de fosforilação durante a diferenciação. A desregulação da expressão ou da função de MAP1B tem sido associada a fenótipos do neurodesenvolvimento e neurodegenerativos, tornando-a relevante para estudos mecanísticos da conectividade neuronal e da patologia do citoesqueleto.
MAP-1B O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MAP1B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MAP1B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MAP1B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MAP1B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.