Partículas Lentivirales de Activación (h) MagT1: sc-404484-LAC

MAGT1 codifica MagT1, un transportador de magnesio localizado en la membrana del retículo endoplásmico que contribuye a la homeostasis intracelular de Mg2+ y respalda procesos enzimáticos y de señalización dependientes de Mg2+. Más allá del transporte iónico, MagT1 se ha vinculado al control de calidad de la N‑glicosilación mediante interacciones con complejos de oligosacariltransferasa, influyendo en la maduración de proteínas y la proteostasis del RE. La alteración de MAGT1 se asocia con fenotipos de disfunción inmunitaria y una activación linfocitaria modificada, en consonancia con funciones en vías de señalización dependientes de calcio/magnesio y sensibles al estado redox. En consecuencia, MAGT1 se estudia en el contexto de la inmunobiología, la glicosilación de proteínas y las respuestas al estrés celular relevantes para modelos de investigación sobre inflamación e infecciones.

Las partículas de activación lentiviral MagT1 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de MAGT1 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral MagT1 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción MAGT1, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de MagT1. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo MAGT1 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.