M-cadherin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401232-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- M-cadherinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase M-cadherin (h) e o Plasmídeo Double Nickase M-cadherin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CDH15. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:M-cadherin Anticorpo (C-8): sc-398107
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
M-cadherin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401232-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
M-cadherin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401232-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O CDH15 humano codifica a M-caderina, uma molécula de adesão célula–célula dependente de cálcio, enriquecida no músculo esquelético e em células satélite, onde dá suporte ao reconhecimento, à adesão e à fusão de mioblastos durante a diferenciação miogênica. Por meio da montagem de junções aderentes e do acoplamento às cateninas e ao citoesqueleto de actina, a M-caderina ajuda a coordenar a polaridade celular, a arquitetura tecidual e programas de mecanotransdução que influenciam a regeneração muscular. A dinâmica de adesão associada ao CDH15 cruza-se com vias que regulam a remodelação do citoesqueleto e o padrão de desenvolvimento, tornando-o relevante para estudos de miogênese e reparo muscular. Alterações na adesão mediada por caderinas têm sido associadas a fenótipos neuromusculares e do desenvolvimento e são frequentemente investigadas em contextos em que o contato célula–célula governa a migração, a diferenciação e a integridade dos tecidos.
M-cadherin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CDH15 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CDH15. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CDH15. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CDH15 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.