LSm11 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-428300-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LSm11O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LSm11 (m) e o Plasmídeo Double Nickase LSm11 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Lsm11. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LSm11 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-428300-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LSm11 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-428300-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Lsm11 de camundongo codifica a LSm11, um componente central da pequena ribonucleoproteína nuclear U7 (snRNP), especializada no processamento da extremidade 3′ de pré-mRNAs de histonas dependentes de replicação. Por meio de sua participação na via de processamento de RNA de histonas dependente de U7, a LSm11 ajuda a garantir a maturação adequada dos transcritos de histonas, acoplando a progressão da fase S à montagem da cromatina e à estabilidade do genoma. Espera-se que a disfunção de LSm11 perturbe a homeostase do mRNA de histonas, com efeitos a jusante nas respostas ao estresse de replicação do DNA e na regulação do ciclo celular. Esses processos são amplamente relevantes para fenótipos proliferativos e para estudos mecanísticos de manutenção da cromatina e integridade genômica em modelos celulares de camundongo.
LSm11 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Lsm11 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Lsm11. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Lsm11. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Lsm11 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.