LDLR Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421408-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LDLRO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LDLR (m) e o Plasmídeo Double Nickase LDLR (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Ldlr. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LDLR Anticorpo (C7): sc-18823
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LDLR Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421408-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene Ldlr de camundongo codifica o receptor de lipoproteína de baixa densidade (LDLR), um receptor endocítico de superfície celular que remove partículas de LDL circulantes por meio de internalização mediada por clatrina em hepatócitos e em outros tecidos. O LDLR controla a captação de colesterol e contribui para a homeostase lipídica ao regular a disponibilidade intracelular de esteróis, o que retroalimenta programas de transcrição controlados por SREBP e vias mais amplas do metabolismo de lipoproteínas. A disfunção ou a atividade reduzida do LDLR é classicamente associada a fenótipos de dislipidemia e a aspectos biológicos relevantes para a aterosclerose, tornando o Ldlr um nó central para estudar o tráfego de colesterol e a regulação sistêmica de lipídios in vivo e em células cultivadas. A perturbação experimental de Ldlr é comumente usada para investigar a cinética de captação de partículas de LDL, a reciclagem do receptor e redes gênicas a jusante responsivas a esteróis.
LDLR O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Ldlr em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Ldlr. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Ldlr. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Ldlr interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.