Lamin B1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400032-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Lamin B1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Lamin B1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Lamin B1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LMNB1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Lamin B1 Anticorpo (A-11): sc-377000
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Lamin B1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400032-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Lamin B1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400032-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LMNB1 codifica a lamina B1, um componente central da lâmina nuclear que polimeriza sob a membrana nuclear interna para manter a forma do núcleo, a organização da cromatina e a mecanotransdução. A lamina B1 participa da desagregação e da remontagem do envelope nuclear durante a mitose, regula a replicação e o reparo do DNA e influencia a transcrição por meio de domínios associados à lâmina (LADs) que posicionam a heterocromatina na periferia nuclear. Alterações na dosagem ou na organização da lamina B1 têm sido associadas a defeitos de mielinização e fenótipos neurodegenerativos e, de forma mais ampla, a vias que governam a estabilidade do genoma, a progressão do ciclo celular e a arquitetura nuclear. Como plataforma de suporte para sinalização e interações com a cromatina, a lamina B1 é frequentemente estudada no contexto de senescência celular, diferenciação e respostas ao estresse.
Lamin B1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LMNB1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LMNB1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LMNB1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LMNB1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.