KIR3.2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405031-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- KIR3.2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase KIR3.2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase KIR3.2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KCNJ6. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
KIR3.2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405031-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
KIR3.2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405031-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KCNJ6 codifica o canal de potássio humano de retificação interna KIR3.2 (GIRK2), um canal iônico regulado por proteína G que acopla a sinalização de GPCR à hiperpolarização da membrana e à redução da excitabilidade celular. O KIR3.2 contribui para a condutância de potássio em neurônios e outros tecidos excitáveis, integrando sinais de neurotransmissores e neuromoduladores por meio de abertura mediada por Gβγ e modulando padrões de disparo, transmissão sináptica e atividade de rede. Esse canal participa de vias que conectam a ativação de GPCR à homeostase iônica e ao controle eletrofisiológico, com efeitos a jusante sobre a entrada de cálcio e a sinalização dependente de atividade. A desregulação ou variação genética em KCNJ6 tem sido associada a fenótipos neurofisiológicos e do neurodesenvolvimento, sustentando sua relevância em estudos de mecanismos de doença impulsionados pela excitabilidade.
KIR3.2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KCNJ6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KCNJ6. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KCNJ6. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KCNJ6 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.