KA2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405272-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- KA2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase KA2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase KA2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GRIK5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
KA2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405272-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
KA2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405272-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GRIK5 codifica a subunidade KA2 do receptor de cainato, um componente de receptor ionotrópico de glutamato que se monta com outras subunidades de cainato para moldar a transmissão sináptica excitatória e a excitabilidade das redes neuronais. A KA2 contribui para a função de canal catiônico ativado por ligante, influenciando a plasticidade sináptica, a modulação pré-sináptica e vias de sinalização a jusante ligadas ao cálcio e à MAPK. Alterações na sinalização glutamatérgica envolvendo o GRIK5 têm sido investigadas em contextos neurodesenvolvimentais e neuropsiquiátricos, incluindo suscetibilidade a convulsões e disfunção de circuitos, nos quais a composição do receptor pode afetar o equilíbrio entre excitação e inibição. Como proteína de membrana sináptica, a KA2 também é relevante para estudos de tráfego de receptores, maturação de sinapses e remodelamento dependente de atividade em modelos neuronais humanos.
KA2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GRIK5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GRIK5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GRIK5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GRIK5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.