IRF3 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-424792-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IRF3O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase IRF3 (m) e o Plasmídeo Double Nickase IRF3 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Irf3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IRF3 Anticorpo (D-3): sc-376455
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IRF3 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-424792-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene Irf3 de camundongo codifica o fator regulador de interferon 3 (IRF3), um fator de transcrição central na imunidade antiviral inata que conecta a detecção de ácidos nucleicos no citosol à produção de interferon do tipo I e à expressão de genes estimulados por interferon. Após a ativação a jusante de vias de PRRs, incluindo cGAS–STING, RIG-I/MDA5–MAVS e TLR3–TRIF, o IRF3 é fosforilado por TBK1/IKKε, dimeriza e transloca-se para o núcleo para coordenar programas transcricionais inflamatórios e antivirais. A sinalização de IRF3 interage com NF-κB e IRF7 para moldar a produção de citocinas, a apoptose e o remodelamento imunometabólico durante infecção e inflamação estéril. A atividade desregulada de IRF3 tem sido implicada na suscetibilidade a infecções virais, em respostas aberrantes de interferon e em patologias inflamatórias, tornando Irf3 um nó-chave para estudos mecanísticos da sinalização imune inata.
IRF3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Irf3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Irf3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Irf3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Irf3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.