Plasmide Double Nickase (m) Integrin α2/ITGA2/CD49b: sc-421159-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Integrin α2/ITGA2/CD49b correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Integrin α2/ITGA2/CD49b Double Nickase (m) et le plasmide Integrin α2/ITGA2/CD49b Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Itga2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Integrin α2/ITGA2/CD49b Antibody (C-9): sc-74466
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Integrin α2/ITGA2/CD49b | sc-421159-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) Integrin α2/ITGA2/CD49b | sc-421159-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin *Itga2* code l’intégrine α2 (ITGA2/CD49b), une sous-unité α qui forme un hétérodimère avec l’intégrine β1 pour constituer un récepteur se liant au collagène et à la laminine, reliant la matrice extracellulaire au cytosquelette d’actine. Par une signalisation « outside-in » et « inside-out », ITGA2 module l’assemblage des adhésions focales et des voies en aval, notamment FAK/Src, PI3K–AKT et MAPK, façonnant l’adhérence, la migration, la survie cellulaires et la mécanotransduction. ITGA2 contribue également aux interactions des plaquettes et des cellules immunitaires avec des matrices riches en collagène, influençant les réponses hémostatiques et inflammatoires. Une dérégulation de la signalisation de l’intégrine α2 a été associée à des modifications du remodelage tissulaire et à des phénotypes invasifs dans divers modèles de maladie, faisant d’*Itga2* une cible utile pour disséquer le dialogue cellule–matrice.
Integrin α2/ITGA2/CD49b Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Itga2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Itga2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Itga2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Itga2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.