Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IL-1α Plasmide Double Nickase (m): sc-421096-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- IL-1α Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il IL-1α Double Nickase Plasmid (m) e il IL-1α Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Il1a. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: IL-1α Antibody (ALF-161): sc-12741
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
IL-1α Plasmide Double Nickase (m) | sc-421096-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il1a nel topo codifica l’interleuchina-1 alfa (IL-1α), una citochina pro-infiammatoria a risposta precoce prodotta da cellule epiteliali, linee mieloidi e altri tipi cellulari sottoposti a stress. IL-1α segnala principalmente attraverso il recettore dell’IL-1 di tipo 1 e la cascata dipendente da MyD88, attivando le vie NF-κB e MAPK e inducendo programmi trascrizionali che regolano il reclutamento dei leucociti, l’attivazione endoteliale e le risposte di fase acuta. Oltre alla segnalazione in forma secreta, IL-1α può agire come alarmina rilasciata in seguito a danno cellulare, collegando l’infiammazione sterile all’attivazione dell’immunità innata. Un’attività deregolata di IL-1α è implicata nel rimodellamento infiammatorio dei tessuti e in patologie immuno-mediate, a supporto del suo impiego in modelli di autoimmunità, dermatite, infiammazione simil-artritica e infiammazione associata ai tumori.
IL-1α Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Il1a nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Il1a. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Il1a. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Il1a interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.