Plasmide Double Nickase (m) IFI-204: sc-421033-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) IFI-204 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IFI-204 Double Nickase (m) et le plasmide IFI-204 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Ifi204. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) IFI-204 | sc-421033-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) IFI-204 | sc-421033-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Ifi204 code IFI-204, un membre murin inductible par les interférons de la famille p200, qui agit comme un régulateur de l’immunité innée sensible aux acides nucléiques. IFI-204 participe à la détection de l’ADN cytosolique et à la modulation des programmes de gènes stimulés par l’interféron, en façonnant la signalisation en aval via l’axe STING–TBK1–IRF3 et des réseaux transcriptionnels inflammatoires apparentés. Au-delà de la réponse aux agents pathogènes, IFI-204 a été associée au contrôle de la progression du cycle cellulaire, de la différenciation et de programmes liés à la sénescence dans des contextes immunitaires et stromaux. Une activité dérégulée d’IFI-204 est donc pertinente dans des modèles d’auto-inflammation, de défense antivirale et de signalisation immunitaire associée aux tumeurs, où les voies de l’interféron et la détection de l’ADN influencent les phénotypes de maladie.
IFI-204 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Ifi204 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Ifi204. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Ifi204. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Ifi204.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.