Histamine H1 Receptor Double Nickaseプラスミド (m): sc-420948-NIC
- 対象生物種: mouse
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- Histamine H1 Receptor Double Nickaseプラスミド (m)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- Histamine H1 Receptorダブルニカースプラスミド（m）およびHistamine H1 Receptorダブルニカースプラスミド（m2）は、Hrh1を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
Histamine H1 Receptor Double Nickaseプラスミド (m) | sc-420948-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Histamine H1 Receptor Double Nickaseプラスミド (m2) | sc-420948-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Hrh1 はマウスのヒスタミン H1 受容体（HRH1）をコードしており、主として Gq/11 を介してシグナル伝達を行う G タンパク質共役受容体です。これによりホスホリパーゼ C が活性化され、細胞内 Ca²⁺ 濃度が上昇し、PKC および MAPK/ERK 経路が刺激されます。HRH1 はヒスタミンの刺激を、平滑筋収縮、血管透過性、神経伝達、免疫細胞活性化を制御する細胞プログラムへと統合します。中枢神経系および末梢組織において、HRH1 は睡眠—覚醒調節、感覚情報処理、炎症性シグナル伝達ネットワークに影響します。HRH1 活性の異常は、アレルギー性炎症、そう痒、気道過敏性、神経炎症性表現型のモデルと関連づけられており、ヒスタミン作動性回路の機序研究において重要です。
Histamine H1 Receptor ダブルニカースプラスミド（m）は、mouse 細胞株における Hrh1 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、Hrh1内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、Hrh1の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、Hrh1が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。