HCN2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405074-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HCN2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HCN2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase HCN2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HCN2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HCN2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405074-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HCN2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405074-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HCN2 codifica o canal 2 ativado por hiperpolarização e regulado por nucleotídeos cíclicos (HCN2), um canal iónico de membrana que conduz a corrente Ih/If e contribui para a atividade marcapasso e para a excitabilidade rítmica em neurónios e nos tecidos do sistema de condução cardíaco. A abertura do canal é desencadeada pela hiperpolarização da membrana e é modulada por cAMP intracelular, ligando o HCN2 à sinalização GPCR–adenilil ciclase e ao controlo do potencial de membrana dependente da atividade. Ao modelar o potencial de repouso, a resistência de entrada e o disparo de rebound, o HCN2 influencia a integração sináptica e as oscilações de rede em células excitáveis. Alterações na função ou na expressão de HCN2 têm sido associadas a perturbações da excitabilidade, incluindo epilepsia e fenótipos de dor neuropática, apoiando a sua utilidade como alvo mecanístico em investigação de canais iónicos e neurofisiologia.
HCN2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HCN2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HCN2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HCN2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HCN2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.