GRK 5 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-420661-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GRK 5O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GRK 5 (m) e o Plasmídeo Double Nickase GRK 5 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Grk5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GRK 5 Anticorpo (D-9): sc-518005
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GRK 5 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-420661-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene **Grk5** de camundongo codifica a **quinase 5 de receptores acoplados à proteína G (GRK5)**, uma quinase de serina/treonina que fosforila GPCRs ativados para iniciar o recrutamento de **β-arrestina**, a dessensibilização do receptor e a internalização. Por meio dessa função, a GRK5 ajuda a ajustar a amplitude e a duração da sinalização em vias a jusante de receptores adrenérgicos, muscarínicos e de quimiocinas, influenciando a dinâmica de segundos mensageiros e programas transcricionais subsequentes. A atividade da GRK5 também se cruza com processos regulatórios mais amplos, incluindo tráfego de membrana e compartimentalização de sinais, e tem sido associada na literatura à sinalização cardiovascular, respostas inflamatórias e regulação de GPCRs em neurônios. Essas conexões tornam o **Grk5** um alvo útil para dissecar o controle de retroalimentação de GPCRs e mapear o redirecionamento de vias sob estímulos de estresse ou relevantes para doenças em sistemas de modelos murinos.
GRK 5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Grk5 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Grk5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Grk5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Grk5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.