GPR50 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402934-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GPR50O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GPR50 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GPR50 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GPR50. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GPR50 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402934-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GPR50 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402934-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GPR50 codifica um recetor órfão acoplado à proteína G (GPCR) estruturalmente relacionado com os recetores de melatonina, mas considerado não canónico na sinalização, com papéis relevantes na regulação neuroendócrina e na biologia associada aos ritmos circadianos. Pode influenciar a responsividade celular às vias da melatonina através de interações recetor–recetor e da modulação do tráfego de GPCRs e da competência de sinalização, afetando processos a jusante ligados ao cAMP e programas transcricionais. Padrões de expressão e variação genética em GPR50 têm sido associados a fenótipos metabólicos e características neuropsiquiátricas, sustentando a sua relevância em estudos de equilíbrio energético, regulação do humor e função hipotalâmica. Como recetor de membrana com expressão enviesada por tecido, o GPR50 também é útil para dissecar a comunicação cruzada (crosstalk) em redes de GPCRs e saídas de sinalização dependentes do contexto em modelos celulares humanos.
GPR50 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GPR50 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GPR50. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GPR50. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GPR50 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.