Plásmido Doble Nickase (h) Glucose Transporter Glut8: sc-403183-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Glucose Transporter Glut8 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Glucose Transporter Glut8 (h) y el plásmido de doble nickasa Glucose Transporter Glut8 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SLC2A8. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Glucose Transporter Glut8 | sc-403183-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Glucose Transporter Glut8 | sc-403183-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC2A8 codifica el transportador de glucosa Glut8 (GLUT8), un transportador facilitador de azúcares que contribuye a la captación celular de carbohidratos y a la distribución intracelular de glucosa de manera dependiente del tejido y del contexto. La actividad de GLUT8 favorece la homeostasis metabólica al influir en el flujo glucolítico, el manejo del glucógeno y programas más amplios de transporte de nutrientes sensibles a la insulina, con efectos posteriores sobre vías de detección energética como AMPK y mTOR. La regulación de la expresión de SLC2A8 y del tráfico del transportador se ha estudiado en relación con fenotipos endocrinos y metabólicos, incluida la resistencia a la insulina y alteraciones en el manejo de la glucosa. Dado que el transporte de glucosa condiciona las demandas anabólicas y redox, SLC2A8 también es relevante para trabajos mecanísticos sobre proliferación, diferenciación y adaptación al estrés en células metabólicamente activas.
Glucose Transporter Glut8 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SLC2A8 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SLC2A8. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SLC2A8. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SLC2A8 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.