GFAT2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406546-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GFAT2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GFAT2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GFAT2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GFPT2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GFAT2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406546-NIC | 20 µg | $410.00 |
GFPT2 codifica a glutamina—frutose-6-fosfato amidotransferase 2 (GFAT2), a enzima limitante da via biossintética das hexosaminas, que converte frutose-6-fosfato e glutamina em glicosamina-6-fosfato. Ao controlar o fluxo em direção à produção de UDP-GlcNAc, a GFAT2 influencia a N- e O-GlcNAcilação de proteínas, o redirecionamento da glicólise e respostas de detecção de nutrientes que conectam a disponibilidade de glicose e glutamina à sinalização celular. Alterações na atividade da via das hexosaminas têm sido associadas à reprogramação metabólica, à regulação da matriz extracelular e a programas transcricionais adaptativos ao estresse relevantes para fenótipos celulares ligados ao diabetes, fibrose e biologia tumoral. Assim, em células humanas, o GFPT2 é um alvo útil para estudar como a regulação dependente de glicosilação impacta a proliferação, a diferenciação e a sinalização inflamatória.
GFAT2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GFPT2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GFPT2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GFPT2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GFPT2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.