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GABAA Rβ3双切口酶质粒(h) | sc-403007-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GABAA Rβ3双切口酶质粒(h2) | sc-403007-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GABRB3 编码人类 GABA\_A 受体的 β3 亚基,是配体门控氯离子通道的核心组成部分,该通道介导中枢神经系统中的快速抑制性神经传递。β3 的整合会影响受体的组装、膜表面转运以及药理学特性,并通过突触与突触外的 GABA 能信号调控神经元兴奋性。GABA\_A 受体活性与膜电位调节及神经网络振荡相耦联,并进一步影响突触成熟与活动依赖性可塑性。GABRB3 的遗传变异或表达失调与神经发育异常及癫痫相关表型有关,因此常用于研究抑制性环路功能障碍的机制。
GABAA Rβ3 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GABRB3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GABRB3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GABRB3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GABRB3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。