FOXQ1 Plasmide Double Nickase (h): sc-403650-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FOXQ1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il FOXQ1 Double Nickase Plasmid (h) e il FOXQ1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira FOXQ1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: FOXQ1 Antibody (C-9): sc-166265
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FOXQ1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403650-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FOXQ1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403650-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FOXQ1 (Forkhead box Q1) codifica un fattore di trascrizione della famiglia forkhead che si lega al DNA tramite un dominio winged-helix conservato, regolando programmi di linea epiteliale. Modula reti geniche che controllano polarità cellulare, differenziamento, proliferazione e motilità, interfacciandosi con vie quali la segnalazione Wnt/β-catenina e i circuiti trascrizionali associati alla transizione epitelio-mesenchimale (EMT). Un’espressione deregolata di FOXQ1 è stata collegata ad alterazioni dell’omeostasi epiteliale e della biologia tumorale, incluse caratteristiche di invasività e metastatizzazione in molteplici modelli di carcinoma. In quanto regolatore nucleare della trascrizione, FOXQ1 è ampiamente studiato per il suo ruolo nell’espressione genica dipendente dalla cromatina e nel rimodellamento specifico del contesto dell’identità epiteliale.
FOXQ1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus FOXQ1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di FOXQ1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di FOXQ1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con FOXQ1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.