Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Fos B Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-400306
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Fos B Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico Fos B, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Fos B Antibody (F-7): sc-398595
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Fos B Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-400306 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
FOSB codifica Fos B, un fattore di trascrizione immediato-precocissimo del complesso AP-1 che dimerizza con proteine della famiglia JUN per regolare l’espressione genica dipendente dagli stimoli. Fos B integra segnali provenienti dalle vie MAPK/ERK, del calcio e dell’AMPc per controllare programmi legati a proliferazione, differenziamento, sopravvivenza e plasticità sinaptica. La sua rapida induzione in seguito all’esposizione a fattori di crescita, allo stress e all’attività neuronale lo rende un utile marcatore e mediatore della trascrizione dipendente dall’attività. Una segnalazione FOSB/AP-1 deregolata è stata associata alla trasformazione oncogena e all’invasività in molteplici contesti tissutali, oltre che a rimodellamenti trascrizionali correlati a disturbi neuropsichiatrici e a neurodegenerazione.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Fos B (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene FOSB in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del FOSB insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto FOSB a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Fos B.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di FOSB per lo studio della segnalazione di Fos B, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni FOSB critici per la funzione di Fos B
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di FOSB per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal Fos B CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal Fos B CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus FOSB. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal Fos B Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR Fos B (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia FOSB per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio FOSB definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.