FMO1 Plasmide Double Nickase (h): sc-404620-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FMO1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il FMO1 Double Nickase Plasmid (h) e il FMO1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira FMO1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: FMO1 Antibody (H-10): sc-376924
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FMO1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404620-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FMO1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404620-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La monoossigenasi 1 contenente flavina (FMO1) è una monoossigenasi microsomiale NADPH-dipendente che catalizza l’ossigenazione di diversi substrati nucleofili, inclusi xenobiotici e ammine endogene, come parte della clearance metabolica di fase I. Nei tessuti umani, FMO1 contribuisce ai processi di ossidoriduzione e di detossificazione all’interno del reticolo endoplasmatico e si integra funzionalmente con reti più ampie di metabolismo dei farmaci insieme agli enzimi del citocromo P450. Le variazioni nell’espressione o nell’attività di FMO1 possono influenzare la capacità di biotrasformazione, incidendo sulla suscettibilità allo stress chimico e modellando fenotipi cellulari dipendenti dall’esposizione. FMO1 è inoltre rilevante per studi meccanicistici sulle perturbazioni metaboliche, sulla gestione dei sottoprodotti ossidativi e sulle differenze interindividuali nella risposta agli xenobiotici.
FMO1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus FMO1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di FMO1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di FMO1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con FMO1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.