Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
EPAS-1 Antibody (190b): sc-13596. Western blot analysis of EPAS-1 expression in non-transfected: sc-117752 (A) and mouse EPAS-1 transfected: sc-120061 (B) 293T whole cell lysates. Detection reagent used: m-IgGκ BP-HRP: sc-516102.
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EPAS-1/HIF-2 alpha双切口酶质粒(m): sc-420183-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- EPAS-1/HIF-2 alpha 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- EPAS-1/HIF-2 alpha双切酶质粒（m）和EPAS-1/HIF-2 alpha双切酶质粒（m2）编码针对Epas1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：EPAS-1/HIF-2 alpha: sc-13596，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
EPAS-1/HIF-2 alpha双切口酶质粒(m) | sc-420183-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EPAS-1/HIF-2 alpha双切口酶质粒(m2) | sc-420183-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Epas1 编码 EPAS-1/HIF-2α，这是一种对氧敏感的转录因子，可与 ARNT 形成异源二聚体，从而协同调控缺氧应答基因的表达。在低氧条件下，EPAS-1/HIF-2α 会积累，并通过 HIF 信号以及与 VEGF、EPO 和糖酵解通路的串扰，启动与血管生成、红细胞生成、细胞代谢和干性样表型相关的程序。在小鼠系统中，Epas1 活性是血管发育和机体对缺氧进行生理适应的核心因素，并与肿瘤、缺血性损伤模型以及炎症微环境中的缺氧驱动重塑广泛相关。EPAS-1/HIF-2α 信号失调也常被用作研究氧感知、转录调控与代谢重编程机制的切入点。
EPAS-1/HIF-2 alpha 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Epas1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Epas1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Epas1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Epas1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。