dystrophin Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-420021-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- dystrophinO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase dystrophin (m) e o Plasmídeo Double Nickase dystrophin (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Dmd. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:dystrophin Anticorpo (7A10): sc-47760
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
dystrophin Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-420021-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
dystrophin Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-420021-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Dmd de camundongo codifica a distrofina, uma grande proteína de ancoragem do citoesqueleto que liga o citoesqueleto de actina ao complexo de glicoproteínas associado à distrofina no sarcolema. Essa ligação estabiliza as membranas das fibras musculares durante a contração e sustenta a mecanotransdução, a homeostase iônica e a organização dos costâmeros e da arquitetura da junção neuromuscular. A perda ou disfunção da distrofina compromete a integridade da membrana e altera processos subsequentes de sinalização e de remodelamento inflamatório no músculo esquelético e cardíaco, tornando o Dmd um gene central para modelar, in vivo e em miotúbulos cultivados, a biologia relevante para distrofias musculares. Estudos sobre Dmd frequentemente se cruzam com vias que controlam a renovação da matriz extracelular, o manejo de cálcio e a sinalização de resposta ao estresse no músculo estriado.
dystrophin O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Dmd em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Dmd. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Dmd. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Dmd interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.