DP2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404990-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DP2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DP2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase DP2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PTGDR2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DP2 Anticorpo (C-5): sc-271898
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DP2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404990-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DP2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404990-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PTGDR2 codifica o DP2 (também conhecido como CRTH2), um receptor acoplado à proteína G que se liga à prostaglandina D2 e a mediadores lipídicos relacionados para regular a quimiotaxia, a ativação e programas de citocinas em células imunes do tipo 2, incluindo linfócitos Th2, eosinófilos e basófilos. A sinalização via DP2 envolve vias dependentes de cAMP e efetores a jusante, como os módulos MAPK e PI3K, moldando o recrutamento de células inflamatórias e a função efetora em superfícies mucosas. Esse eixo é frequentemente estudado no contexto da inflamação alérgica e de uma desregulação imune mais ampla, em que alterações na sinalização por prostaglandinas podem influenciar o tráfego de leucócitos e o remodelamento tecidual. Como um receptor de membrana com sinalização bem definida e dirigida por ligante, o DP2 constitui um alvo acessível para dissecar a comunicação mediada por eicosanoides entre compartimentos estromais e imunes.
DP2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PTGDR2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PTGDR2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PTGDR2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PTGDR2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.