Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DGS8 Plasmide Double Nickase (h): sc-404631-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- DGS8 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il DGS8 Double Nickase Plasmid (h) e il DGS8 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira DGCR8. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: DGS8 Antibody (E-10): sc-377249
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
DGS8 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404631-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DGS8 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404631-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DGCR8 (DGS8) codifica una componente centrale del complesso nucleare Microprocessor, che agisce in coppia con DROSHA per riconoscere e tagliare i trascritti primari dei microRNA in miRNA precursori, modellando la biogenesi globale dei miRNA. Attraverso questo ruolo, DGCR8 influenza programmi di regolazione genica post-trascrizionale che controllano la progressione del ciclo cellulare, la differenziazione e le risposte allo stress. Le vie dei miRNA dipendenti da DGCR8 si intersecano con la regolazione della cromatina e con reti di segnalazione che modulano l’impegno di linea (lineage commitment) e l’omeostasi dell’RNA. Alterazioni del dosaggio o della funzione di DGCR8 sono state associate a profili di miRNA deregolati e vengono studiate nel contesto dei meccanismi di malattie neuroevolutive e proliferative.
DGS8 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus DGCR8 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di DGCR8. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di DGCR8. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con DGCR8 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.