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DDX3X双切口酶质粒(h) | sc-401253-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DDX3X双切口酶质粒(h2) | sc-401253-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DDX3X 编码一种 ATP 依赖性的 DEAD-box RNA 解旋酶,可协调 RNA 代谢的多个步骤,包括 pre-mRNA 剪接、mRNA 输出、翻译起始以及应激颗粒动态。通过重塑 RNA–蛋白复合物,DDX3X 整合影响细胞周期进程、先天免疫感知和细胞应激反应的信号线索。DDX3X 的失调或突变与神经发育表型相关,并在多种癌症背景中反复被观察到,反映其对 RNA 加工与蛋白质稳态的广泛影响。这些特性使 DDX3X 成为研究 RNA 解旋酶功能、翻译调控以及将 RNA 调控与增殖和应激适应相耦联通路的有用节点。
DDX3X 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 DDX3X 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DDX3X内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏DDX3X的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了DDX3X基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。