Date published: 2026-7-22

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CRABP-I Plasmídeo duplo de Nickase (h2): sc-405485-NIC-2

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Fichas de dados
  • alvos específicos: human
  • 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
  • CRABP-IO plasmídeo de dupla Nickase (h2) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
  • Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
  • Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
  • O Plasmídeo Double Nickase CRABP-I (h2) e o Plasmídeo Double Nickase CRABP-I (h22) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CRABP1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
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    CRABP-I Plasmídeo duplo de Nickase (h2)

    sc-405485-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    O gene humano CRABP1 codifica a proteína celular de ligação ao ácido retinoico 1 (CRABP-I), um transportador citosólico de alta afinidade que sequestra e transporta o ácido retinoico all-trans, moldando sua disponibilidade intracelular e sua sinalização espaço-temporal. Ao modular a distribuição de retinoides, a CRABP-I influencia programas transcricionais dependentes de ácido retinoico mediados por receptores nucleares (RAR/RXR) e afeta processos como diferenciação, proliferação e padronização do desenvolvimento. Alterações na homeostase de retinoides e na expressão de CRABP1 têm sido associadas à desregulação da sinalização no câncer e em outros distúrbios ligados ao metabolismo da vitamina A e aos estados de diferenciação celular. Estudos de edição gênica e de perturbação de CRABP1 sustentam a dissecação mecanística de redes de sinalização de retinoides, da dinâmica de tamponamento de ligantes e dos desfechos transcricionais em modelos relevantes de células humanas.

    CRABP-I O Plasmídeo de Nickase Dupla (h2) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CRABP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CRABP1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CRABP1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

    Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CRABP1 interrompido.

    Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.