非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
Cosmc双切口酶质粒(h): sc-409904-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Cosmc 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Cosmc双切酶质粒（h）和Cosmc双切酶质粒（h2）编码针对C1GALT1C1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Cosmc: sc-271829，通过WB, IF或者IHC分析
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| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Cosmc双切口酶质粒(h) | sc-409904-NIC | 20 µg | $410.00 |
C1GALT1C1 编码 Cosmc，这是一种定位于内质网的分子伴侣蛋白，负责核心 1 β1,3-半乳糖基转移酶（C1GALT1）的正确折叠与稳定性，从而使核心 1 型 O-聚糖的生物合成得以进行。通过支持黏蛋白型 O-糖基化，Cosmc 会影响依赖完整 O-聚糖结构的蛋白转运、细胞–细胞相互作用以及凝集素介导的信号传导。Cosmc 的缺失或功能异常会破坏 O-聚糖的延伸，促使 Tn 抗原和唾液酸化 Tn（sialyl-Tn）等截短型 O-聚糖累积，从而改变糖蛋白组及细胞表面受体的行为。与 Cosmc 相关的异常 O-糖基化模式已被关联到免疫识别改变及恶性转化等情境，使 C1GALT1C1 成为开展糖生物学机制研究的有用靶点。
Cosmc 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 C1GALT1C1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对C1GALT1C1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏C1GALT1C1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了C1GALT1C1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。