COL11A1 Plasmide Double Nickase (h): sc-403512-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- COL11A1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il COL11A1 Double Nickase Plasmid (h) e il COL11A1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira COL11A1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
COL11A1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403512-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
COL11A1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403512-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
COL11A1 codifica la catena α1 del collagene di tipo XI, un collagene fibrillare quantitativamente minoritario ma funzionalmente importante, che si co-assembla con il collagene di tipo II per regolare il diametro delle fibrille di collagene, la loro spaziatura e le proprietà di resistenza alla trazione nella matrice extracellulare. È altamente rilevante per la biologia della cartilagine e dei tessuti connettivi, dove contribuisce all’organizzazione della matrice, alla differenziazione dei condrociti e alla segnalazione legata alla meccanotrasduzione. Alterazioni dell’espressione o della sequenza di COL11A1 sono state associate a fenotipi di rimodellamento della matrice extracellulare e a disturbi del tessuto connettivo, ed è spesso studiato nel contesto di firme stromali e della desmoplasia del microambiente tumorale. In quanto gene strutturale della ECM, COL11A1 rappresenta un punto di accesso pratico per indagare vie dipendenti dalla matrice, incluse l’adesione mediata dalle integrine, la dinamica delle adesioni focali e i programmi di rimodellamento associati al TGF-β.
COL11A1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus COL11A1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di COL11A1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di COL11A1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con COL11A1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.