CDK5RAP3 Plasmide Double Nickase (h): sc-408965-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CDK5RAP3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CDK5RAP3 Double Nickase Plasmid (h) e il CDK5RAP3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CDK5RAP3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CDK5RAP3 Antibody (E-7): sc-271776
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CDK5RAP3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-408965-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CDK5RAP3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-408965-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDK5RAP3 (nota anche come C53/LZAP) è una proteina adattatrice multifunzionale implicata nella regolazione della progressione del ciclo cellulare, delle risposte allo stress e della segnalazione intracellulare. È stata collegata alla modulazione della segnalazione di NF-κB e a interazioni con vie di controllo della qualità proteica dipendenti dall’ubiquitina, influenzando gli output trascrizionali e la proteostasi. CDK5RAP3 partecipa inoltre all’omeostasi del reticolo endoplasmatico e a processi correlati all’autofagia, collegando il rilevamento dello stress cellulare al controllo della crescita. Un’espressione o una funzione deregolata di CDK5RAP3 è stata associata a fenotipi di proliferazione e sopravvivenza alterati, riportati in ambito oncologico e in contesti di ricerca legati all’infiammazione.
CDK5RAP3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CDK5RAP3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CDK5RAP3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CDK5RAP3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CDK5RAP3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.