Plásmido Doble Nickase (h) CD67: sc-405743-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CD67 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CD67 (h) y el plásmido de doble nickasa CD67 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CEACAM8. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CD67 Anticuerpo (GM2H6): sc-101383
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CD67 | sc-405743-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CD67 | sc-405743-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CEACAM8 codifica CD67, un miembro asociado a los granulocitos de la familia de moléculas de adhesión celular relacionadas con el antígeno carcinoembrionario, que se encuentra enriquecido en los neutrófilos humanos y se sobreexpresa durante la activación. CD67 participa en interacciones célula–célula y contribuye a la adhesión de neutrófilos, a respuestas asociadas a la desgranulación y a la modulación de la señalización inflamatoria en el sistema inmunitario innato. Debido a su papel en el tráfico leucocitario y en la función efectora, CEACAM8 se estudia con frecuencia en vías vinculadas a la inmunidad de mucosas, la defensa antimicrobiana y la inflamación impulsada por citocinas. Los patrones de expresión alterados en células mieloides y tejidos inflamados han convertido a CEACAM8 en un marcador de investigación útil en estudios de trastornos inflamatorios e infiltración inmunitaria asociada a tumores.
CD67 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CEACAM8 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CEACAM8. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CEACAM8. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CEACAM8 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.