Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CD24 Double Nickaseプラスミド (h): sc-418762-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- CD24 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- CD24ダブルニカースプラスミド（h）およびCD24ダブルニカースプラスミド（h2）は、CD24を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: CD24 抗体 (SN3): sc-19585
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
CD24 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-418762-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD24 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-418762-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD24は、高度に糖鎖修飾されたGPIアンカー型の細胞表面タンパク質をコードしており、細胞―細胞および細胞―細胞外基質（マトリックス）間相互作用の調節因子として機能するとともに、免疫・炎症シグナル伝達の強度を調整する役割を担います。CD24はB細胞の成熟や抗原応答性経路を制御しうるほか、Siglec受容体との相互作用を介した抑制性シグナル伝達にも関与して、自然免疫の活性化やサイトカイン産生の様式を形作ります。上皮系および造血系の文脈では、CD24発現の変化が接着、遊走、分化プログラムの変動と関連し、複数のがんモデルにおいて転移様の挙動や腫瘍微小環境とのクロストークといった過程との結び付きが示されています。さらにCD24は、多様な組織で系譜マーカーおよび幹細胞／前駆細胞関連マーカーとしても用いられており、細胞集団の不均一性や状態遷移の機構解明研究を支えています。
CD24 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における CD24 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、CD24内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、CD24の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、CD24が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。