CD206/Mannose Receptor/MMR Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (m): sc-421707-LAC

Mrc1 codifica o CD206/Receptor de Manose (MMR), um receptor “scavenger” do tipo lectina C enriquecido em macrófagos e células dendríticas, que se liga a glicanos contendo manose, fucose e N-acetilglicosamina presentes em patógenos e em glicoproteínas endógenas. O CD206 medeia endocitose e fagocitose dependentes de clatrina, apoiando a captação e o processamento de antígenos, o tráfego lisossomal e o reconhecimento de glicanos na imunidade inata. É amplamente utilizado como marcador de polarização alternativa (tipo M2) de macrófagos e participa em vias que moldam a remodelação tecidual, a reparação de feridas e programas de citocinas imunorreguladoras. A alteração da expressão de CD206 está implicada em inflamação crónica, fibrose, disfunção metabólica e na biologia de macrófagos associados a tumores, tornando o Mrc1 relevante para estudos de regulação do microambiente e de interações hospedeiro–patógeno em modelos murinos.

As Partículas de Ativação Lentivirais CD206/Mannose Receptor/MMR (m) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de Mrc1 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais CD206/Mannose Receptor/MMR (m) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição Mrc1, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de CD206/Mannose Receptor/MMR. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo Mrc1 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.