Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CD14 Plasmide Double Nickase (m): sc-419531-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CD14 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CD14 Double Nickase Plasmid (m) e il CD14 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Cd14. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CD14 Antibody (H-4): sc-515785
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CD14 Plasmide Double Nickase (m) | sc-419531-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD14 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-419531-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene Cd14 del topo codifica CD14, un co-recettore ancorato tramite glicosilfosfatidilinositolo (GPI) che lega il lipopolisaccaride batterico e altri ligandi associati ai patogeni, facilitando il riconoscimento da parte dell’immunità innata. CD14 coopera con il complesso TLR4–MD-2 per amplificare la segnalazione dipendente da MyD88 e TRIF, promuovendo l’attivazione di NF-κB e degli IRF e le conseguenti risposte a citochine e interferoni di tipo I. Contribuisce inoltre all’internalizzazione del ligando, al traffico endosomiale e alla modulazione di programmi infiammatori correlati all’inflammasoma nelle cellule mieloidi. Una segnalazione di CD14 deregolata è associata a stati infiammatori aberranti ed è ampiamente studiata in modelli di risposte tipo sepsi, infiammazione metabolica e processi neuroinfiammatori.
CD14 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Cd14 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Cd14. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Cd14. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Cd14 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.