casein kinase IIα′ Double Nickaseプラスミド (h): sc-401148-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- casein kinase IIα′ Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- casein kinase IIα′ダブルニカースプラスミド（h）およびcasein kinase IIα′ダブルニカースプラスミド（h2）は、CSNK2A2を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
casein kinase IIα′ Double Nickaseプラスミド (h) | sc-401148-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
casein kinase IIα′ Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-401148-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CSNK2A2は、カゼインキナーゼII（CK2）のα′触媒サブユニットをコードする遺伝子で、恒常的に活性を有するセリン／スレオニンキナーゼです。CK2は調節性βサブユニットと会合してCK2ホロ酵素を形成します。CK2は、細胞周期の進行、DNA損傷シグナル伝達、クロマチン制御、リボソーム生合成に関与する幅広い基質をリン酸化し、Wnt/β-カテニン、NF-κB、PI3K/AKTなどの経路とも交差して、増殖やストレス応答を調整します。これらの機能を通じてCSNK2A2は、プロテオスタシスの維持や、がんをはじめリン酸化ネットワークの変調を特徴とする疾患でしばしば破綻する転写プログラムに寄与します。CK2活性の撹乱はまた、多様なヒト細胞モデルにおいて、キナーゼ依存的なアポトーシス、分化、炎症性シグナル伝達の制御を研究するためにも用いられます。
casein kinase IIα′ ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における CSNK2A2 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、CSNK2A2内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、CSNK2A2の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、CSNK2A2が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。