CaM III Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400953-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CaM IIIO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CaM III (h) e o Plasmídeo Double Nickase CaM III (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CALM3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CaM III Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400953-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CaM III Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400953-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano **CALM3** codifica a **calmodulina III (CaM III)**, um sensor de Ca2+ expresso de forma ubíqua que se liga a diversos alvos para converter sinais transitórios de cálcio em respostas celulares coordenadas. A CaM III regula processos-chave, incluindo a sinalização por **CaMK** e **calcineurina/NFAT**, o metabolismo de nucleotídeos cíclicos e o controle de abertura/fechamento de canais iônicos, influenciando assim o acoplamento excitação–contração, a atividade sináptica, a secreção e a progressão do ciclo celular. Por meio da modulação de programas de fosforilação e transcrição, vias dependentes de calmodulina moldam a função mitocondrial e as respostas ao estresse e são frequentemente investigadas em estudos de arritmogênese, fenótipos do neurodesenvolvimento e sinalização proliferativa. Alterações no manejo de cálcio e disfunções na rede de calmodulina são, portanto, relevantes para modelos mecanísticos de doenças cardiovasculares e neurológicas e para o mapeamento de vias em diversos tipos celulares.
CaM III O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CALM3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CALM3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CALM3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CALM3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.