Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Brm Plasmide Double Nickase (h): sc-401049-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Brm Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Brm Double Nickase Plasmid (h) e il Brm Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SMARCA2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Brm Antibody (E-1): sc-17828
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Brm Plasmide Double Nickase (h) | sc-401049-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Brm Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401049-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SMARCA2 codifica Brm, una subunità catalitica ATP-dipendente del complesso di rimodellamento della cromatina SWI/SNF (BAF) che riposiziona i nucleosomi per regolare la trascrizione, l’accessibilità degli enhancer e i processi che utilizzano il DNA come stampo. Brm integra segnali provenienti da fattori di trascrizione specifici di linea per modulare programmi che controllano la progressione del ciclo cellulare, la differenziazione e le risposte al danno al DNA, e coopera con altri componenti del BAF per plasmare gli stati della cromatina. Grazie ai suoi ruoli nell’organizzazione della cromatina e nel controllo trascrizionale, SMARCA2 è spesso studiato nel contesto della disregolazione epigenetica e dei programmi di espressione genica proliferativi o di sviluppo alterati osservati nel cancro e in altri disturbi che coinvolgono difetti di rimodellamento della cromatina.
Brm Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SMARCA2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SMARCA2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SMARCA2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SMARCA2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.