Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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BMAL1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400808-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BMAL1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase BMAL1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase BMAL1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ARNTL. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BMAL1 Anticorpo (B-1): sc-365645
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BMAL1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400808-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BMAL1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400808-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ARNTL codifica a BMAL1, um fator de transcrição central do tipo basic helix–loop–helix PAS que forma heterodímeros com CLOCK/NPAS2 para impulsionar a expressão génica circadiana através de elementos E-box. Este oscilador transcricional coordena a temporização celular do metabolismo, a homeostase redox, o controlo do ciclo celular e as respostas a danos no DNA, integrando sinais em vias hepáticas, imunitárias e neuronais. A atividade de BMAL1 influencia a regulação rítmica da função mitocondrial, do metabolismo de lípidos e glicose e de programas transcricionais inflamatórios, tornando o ARNTL um nó-chave que liga a disrupção circadiana a fenótipos cardiometabólicos, perturbações neurocomportamentais e a reprogramação transcricional associada a tumores. Consequentemente, o ARNTL é amplamente estudado em cronobiologia e biologia de sistemas para mapear redes controladas pelo relógio e os seus resultados funcionais a jusante.
BMAL1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ARNTL em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ARNTL. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ARNTL. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ARNTL interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.