Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
BChE Plasmide Double Nickase (h): sc-401834-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- BChE Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il BChE Double Nickase Plasmid (h) e il BChE Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira BCHE. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: BChE Antibody (D-5): sc-377403
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
BChE Plasmide Double Nickase (h) | sc-401834-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BChE Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401834-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La butirrilcolinesterasi (BCHE) codifica per la BChE, un’idrolasi serinica secreta, abbondante nel plasma, che idrolizza esteri della colina e contribuisce all’omeostasi colinergica sistemica. Eliminando e metabolizzando una gamma di substrati esterici, la BChE si interseca con il metabolismo degli xenobiotici e con i processi di detossificazione, e può influenzare la disponibilità di acetilcolina nei tessuti periferici. La variabilità genetica e di espressione in BCHE è stata associata ad alterazioni dell’attività colinesterasica e a fenotipi rilevanti per la neurobiologia, il metabolismo e le risposte infiammatorie, rendendolo un locus utile per studi meccanicistici. BCHE è inoltre ampiamente utilizzato come gene biomarcatore funzionale negli studi sulla regolazione delle colinesterasi e sulle vie di sensibilità agli organofosfati.
BChE Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus BCHE nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di BCHE. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di BCHE. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con BCHE interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.