Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
BARD1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401212-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BARD1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase BARD1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase BARD1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para BARD1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BARD1 Anticorpo (E-11): sc-74559
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BARD1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401212-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BARD1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401212-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BARD1 (domínio RING 1 associado a BRCA1) é uma proteína supressora tumoral que forma um heterodímero obrigatório com BRCA1 para criar um complexo de ligase E3 de ubiquitina central para a estabilidade do genoma. Esse complexo coordena o reparo de quebras de dupla fita do DNA, a proteção da forquilha de replicação e a sinalização de checkpoints do ciclo celular, ligando BARD1 à recombinação homóloga e a vias mais amplas de resposta a danos no DNA. Por meio de seus domínios RING e de repetições de anquirina, BARD1 ajuda a regular a ubiquitinação de proteínas e o recrutamento de fatores de reparo nos locais de dano. A desregulação ou variantes patogênicas em BARD1 têm sido associadas a uma capacidade reduzida de reparo do DNA e ao aumento da instabilidade genômica, reforçando sua relevância em estudos sobre mecanismos de suscetibilidade ao câncer.
BARD1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus BARD1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de BARD1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função BARD1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com BARD1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.