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ATRX慢病毒激活颗粒(h) | sc-400454-LAC | 200 µl | $455.00 |
人类 ATRX 基因编码一种类似 SWI/SNF 的 ATP 依赖性染色质重塑因子,定位于异染色质,并调控转录、复制相关的染色质动态以及基因组稳定性。ATRX 与 DAXX 协同作用,将组蛋白变体 H3.3 沉积到重复 DNA 上,包括端粒和近着丝粒区域,从而影响表观遗传沉默与染色质可及性。通过参与 DNA 复制应激反应以及维持端粒染色质,ATRX 影响调控有丝分裂保真性和细胞分化程序的相关通路。ATRX 功能失调或缺失与发育综合征有关,并且在采用端粒替代延长机制(ALT)的肿瘤中常见,将 ATRX 与端粒生物学及致癌相关的表观遗传状态联系起来。
ATRX 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 ATRX 表达。
ATRX 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在ATRX转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性ATRX表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 ATRX 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。