Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ATP7A Plasmide Double Nickase (h): sc-402387-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ATP7A Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ATP7A Double Nickase Plasmid (h) e il ATP7A Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ATP7A. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ATP7A Antibody (D-9): sc-376467
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ATP7A Plasmide Double Nickase (h) | sc-402387-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ATP7A Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402387-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATP7A codifica una ATPasi di tipo P trasportatrice di rame che si localizza principalmente nella rete trans-Golgi e traffica verso la membrana plasmatica per regolare la distribuzione e l’efflusso del rame intracellulare. Fornendo rame agli enzimi della via secretoria e mantenendo l’omeostasi del rame, ATP7A supporta la maturazione e l’attività di molte cuproenzimi implicati nel controllo dello stress ossidativo, nella biologia del tessuto connettivo e nel neurosviluppo. La sua funzione si interseca con il trasporto di ioni metallici, il traffico vescicolare e vie sensibili al redox che modellano il metabolismo e la segnalazione cellulare. La disregolazione di ATP7A è associata a disturbi ereditari del trasporto del rame e a fenotipi più ampi compatibili con una compromissione della funzione dei cuproenzimi.
ATP7A Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ATP7A nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ATP7A. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ATP7A. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ATP7A interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.