ATP5F1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405710-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ATP5F1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ATP5F1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ATP5F1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ATP5F1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ATP5F1 Anticorpo (C-12): sc-514419
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ATP5F1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405710-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ATP5F1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405710-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATP5F1 codifica o núcleo catalítico da ATP sintase mitocondrial F1F0 (Complexo V), uma enzima essencial que acopla a fosforilação oxidativa à produção de ATP através da membrana interna da mitocôndria. Ao converter a força protomotriz em ATP celular, a ATP5F1 sustenta processos dependentes de energia, incluindo homeostase iónica, biossíntese e adaptação ao stress, e integra-se com a atividade da cadeia de transporte de eletrões e o controlo do potencial de membrana mitocondrial. A perturbação da função da ATP sintase está associada a disfunção mitocondrial, alterações no controlo de espécies reativas de oxigénio e reprogramação metabólica que podem influenciar a sobrevivência e a proliferação celulares. Como nó central na bioenergética, a ATP5F1 é frequentemente estudada no contexto de fenótipos neuromusculares e neurodegenerativos, bem como das contribuições mitocondriais para o metabolismo de células tumorais.
ATP5F1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ATP5F1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ATP5F1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ATP5F1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ATP5F1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.