ATP11B Lentiviral Activation Particles (h): sc-411692-LAC

ATP11BはP4-ATPase型のリン脂質フリッパーゼをコードしており、ATP依存的にアミノリン脂質を脂質二重層の片側から反対側へ移送することで、細胞膜および細胞内小器官膜の脂質非対称性の維持に寄与します。ATP11Bは膜組成の調節を介して、小胞形成、エンドソーム輸送、リサイクリング過程に影響を与え、ゴルジ体―エンドソーム間輸送や、より広範な分泌経路のダイナミクスとも交差します。脂質非対称性や輸送の破綻は、シグナル伝達、細胞極性、ストレス応答に影響し得るため、ATP11Bは膜恒常性や輸送関連表現型の研究において重要です。ATP11Bの活性や発現の変化は、薬剤動態、ストレス下での生存、膜タンパク質の細胞内分布変化といった、疾患に関連する細胞挙動の文脈で検討されてきました。

ATP11B レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なATP11Bの発現上昇を可能にします。

ATP11B レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、ATP11B転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性ATP11Bの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のATP11Bゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。