ATF3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-416577-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ATF3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ATF3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ATF3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ATF3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ATF3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-416577-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ATF3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-416577-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATF3 (fator de transcrição ativador 3) é um fator de transcrição bZIP de resposta imediata e induzível por estresse, que integra diversos sinais celulares, incluindo as vias MAPK/JNK, NF-κB e a resposta a proteínas mal dobradas (unfolded protein response, UPR). Ao se ligar a elementos do tipo CRE/ATF e formar homo- ou heterodímeros com membros da família AP-1, o ATF3 modula programas transcricionais que controlam inflamação, apoptose, adaptação do ciclo celular e reprogramação metabólica. Sua expressão é rapidamente induzida por dano ao DNA, estresse oxidativo, citocinas e estresse do retículo endoplasmático, posicionando o ATF3 como um regulador-chave de respostas transcricionais adaptativas. A atividade desregulada de ATF3 tem sido associada à biologia tumoral, à sinalização imune e a modelos de lesão tecidual, tornando-o útil para dissecar redes de estresse e inflamação dependentes do contexto em células humanas.
ATF3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ATF3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ATF3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ATF3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ATF3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.