Asparagine synthetase Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-424181-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Asparagine synthetaseO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Asparagine synthetase (m) e o Plasmídeo Double Nickase Asparagine synthetase (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Asns. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Asparagine synthetase Anticorpo (G-10): sc-365809
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Asparagine synthetase Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-424181-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Asparagine synthetase Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-424181-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Asns de camundongo codifica a asparagina sintetase, uma enzima citosólica que catalisa a conversão, dependente de ATP, de aspartato e glutamina em asparagina e glutamato, mantendo os estoques intracelulares de asparagina e a homeostase do nitrogênio. A atividade de ASNS sustenta a biossíntese de aminoácidos e se integra a programas de detecção de nutrientes, incluindo a resposta integrada ao estresse e a transcrição regulada por ATF4 durante a limitação de aminoácidos. A perturbação da disponibilidade de asparagina influencia a tradução proteica, o equilíbrio redox e a reprogramação metabólica, conectando a ASNS à adaptação celular sob estresse nutricional. Na pesquisa biomédica, o Asns é frequentemente estudado em contextos de vulnerabilidade metabólica, sinalização de estresse e fenótipos de dependência de aminoácidos relevantes para o metabolismo de células cancerígenas e para transtornos do neurodesenvolvimento.
Asparagine synthetase O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Asns em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Asns. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Asns. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Asns interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.